Påvisning av næringsmiddelpatogener med PCR

Denne rapporten beskriver bruken av den molekylære metoden ”Polymerase Chain Reaction” (PCR) for identifisering av utvalgte sykdomsfremkallende bakterier i næringsmidler. Arbeidet er basert på et samarbeidsprosjekt mellom Forsvarets sanitet (FSAN) og Forsvarets forskningsinstitutt (FFI). Prosjektet har omhandlet forstudier for bruken av real-time PCR for å raskere kunne identifisere potensielle næringsmiddelpatogener. Rapporten beskriver isolering av nukleinsyrer fra matpatogenene Bacillus cereus og Salmonella typhimurium i hhv melk og egg, samt en optimalisert real-time PCR-analyse, med spesifikke primere, for identifisering av disse bakterieartene. Analysene er utført ved hjelp av et SmartCycler® PCR-instrument. Deteksjonsgrensen for identifisering av B. cereus i melk (H- og lett melk) og S. typhimurium i egg (hvite og plomme) ble bestemt til hhv 103 og 104 celler/ml. I tillegg ble betingelsene for real-time PCR-reaksjonene optimalisert og tilrettelagt for identifisering av Vibrio cholerae, Escherichia coli O157 og Clostridium perfringens.